RESUMO
O desenvolvimento de ferramentas analíticas para diagnosticar situações de estrés é fundamental na avaliação do deterioração ambiental. O estudo da presença dos poluente deveria ir junto para as respostas biológicas. Estes estudos são especialmente importantes quando eles forem poluente emergentes considerados, como eles fossem que o fármacos genérico que alcançam os sistemas aquáticos como conseqüência de não ter purificador novamente eficiente para estes poluente digitam. A colocação sobre para metodologias apropriadas e eficientes analíticas para estes poluente deveria ir junto para o desenvolvimento de ómicas de tecnologias que pode fazer um papel essencial para um conhecimento maior das respostas biológicas.
A área de estudo é centrada em pântanos e ecossistemas aquáticos da região fronteiriça de Espanha e Portugal. É em particular considerado a Baía de Cádiz, o Riacho de Huelva, o Lugar Natural Marimas de Odiel (Huelva), nesses que numerosos pássaros migratórios e uma população rica habitam de covarde, o Marisma Domingo Rubio, os Pântanos de Ilha a Cristina, o Rio Guadiamar (em Espanha Portugal oposta) e o Riacho Formosa (Portugal). Como bioindicadores que Scrobicularia chamam, galinha de Chamalaea e diversicolor de Nerea eram usados, embora o estudo não exclui o estudo de algum ictícola de espécies ou marisqueras de comecial de interesse ou alimentar.
Serão usadas metodologias analíticas de última geração como as ligações HPLC-MS, HPLC-ICP-MS, proteómicos de procedimentos baseado em 2-DE com MALDI-TOF-MS e metalómicas técnico com cromatografía multidimensional, ICP-MS e espectrometría de massas em tandem.
PROPÓSITO DO PROJETO
Antecedentes
Entre os numerosos poluente que afetam aos ecossistemas aquáticos eles deveriam ser incluídos o fármacos hoje em dia usado para o tratamento de doenças humanas e dos animais. Estas substâncias são consideradas como poluente emergentes para esses que uma metodologia estabelecida analítica não existe e não é conhecido os níveis nos sistemas aquáticos, terrestres e marinhos, nem o metabolitos que gera. Estas combinações não são degradadas completamente no purificador e eles têm uma ação importante toxicológica. As ações potenciais destas combinações são muito diversas, sendo podido ativar mecanismos biológicos diferentes de defesa depois de uma exibição prolongada para o mesmo. Estas substâncias podem afetar a numerosas funções dos organismos terrestres ou marinhos que alteram a viabilidade das populações e a possibilidade de uso destes organismos como comida. Como conseqüência disto, sua influência na conservação dos ecossistemas é muito crítica. Alguns deste fármacos podem afetar a todo o tipo de organismos vivos. Entre estas combinações eles podem fazer um compromisso o relievers de dor, antinflamatórios, antibióticos e antidepressivos.
Também, é proeminente a produção crescente de ictícolas de espécies e molusco para o consumo humano em acuícolas de instalações, o que está constituindo uma fonte adicional de contaminação, determinado o uso de antibióticos para a preservação de doenças. Estas substâncias podem afetar finalmente às espécies da pesca de captura. É necessário considerar que embora os medicamentos normalmente não são compostos persistente, a contribuição contínua deles/delas os transforma em poluente crônicos dos organismos aquáticos.
Estude área
O estudo será centrado em ecossistemas diversos do sistema litoral do Sudoeste de Espanha-Portugal (região Algarve-Huelva) onde vários pântanos de grande importância ecológica ficam situados: Formosa (Portugal), riso de Rio Guadiana (Espanha-Portugal), Pântanos de Ilha a Cristina (Huelva), Lugar Pântanos Naturais de Odiel (Huelva) e Baía de Cádiz nesses que numerosos pássaros migratórios e uma população rica habitam de covarde (Scrobicularia chamam, diversicolor de Nereis, galinha de Chamelaea).
Propósito
É buscado desenvolver procedimentos analíticos para o estudo, a caracterização e diagnose da presença de fármacos genérico de caráter em pântanos com importância ecológica da fronteira sul de Espanha-Portugal, na área Algarve-Huelva-Cádiz.
OBJETIVOS DO PROJETO
Objetivo Geral
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Desenvolver procedimentos analíticos para o estudo, a caracterização e diagnose da presença de fármacos genérico de caráter em pântanos com importância ecológica da fronteira sul de Espanha-Portugal, na área Algarve-Huelva-Cádiz.
Objetivo Específico
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Pôr para apontar metodologias analíticas para a análise de fármacos nos ecossistemas em estudo.
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Aplicar metodologias analíticas em ecossistemas do Sudoeste de Espanha-Portugal (região Algarbe-Huelva).
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Estudar biomarcadores molecular fundado na caracterização de antioxidativas de enzimas, biotransformadoras de enzimas, danifica oxidativos em biomoléculas e níveis de 'metalotioneinas' e 'acetilcolinoesterasa'.
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Estudar os efeitos causados por fármacos em bioindicadores diverso da área de estudo: (EU) S. página (hepatopancreas e brânquias) e diversicolo de Nereis.
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Integrar os resultados e análise de dados.
METODOLOGIA E PLANO DE TRABALHO
Ele seria levado fora uma amostragem de lodo e organismos em estações selecionadas em cada um das áreas de estudo em ordem para:
- Analisar os níveis de Ibuprofeno combinação, Quinolonas, Diclofenac e Carbamezapine.
- Levar a cabo testes no efeito do fármacos mencionaram no biomarcadores que será objeto de estudo (Scrobicularia chamam e galinha de Chamelaea), enquanto analisando respostas a nível de oxidativo de estrés, proteómico, genómico e metalómico.
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A. Definindo sobre como metodologia para análise de fármacos
O fármacos que usam uma acetonitrilo-água de mistura serão (3:7) entre fosfórico e sonda de ultrasonidos. O extrato purificou por meio de extração em fase sólida (C -18), é analisado por meio de cromatografía líquido com descobrir de fluorescência e ultravioleta, usando como fase móvel uma mistura de acetonitrilo-água com fosfato de tampão e laurilsulfato de sódio.
As penicilinas serão determinadas por meio de HPLC de contrário e fase detectora de UV. A extração das combinações será levada a cabo em fase aguada por meio da precipitação de componentes orgânicos com uma mistura de H2SO4 e wolframato de sódio. A limpeza destes extratos será levada a cabo por meio de SPE com um polimérico de adsorbente (divinilbenceno-co-N-vinilpirrolidona), completando isto por meio de extração líquido-líquido com dietileter. Os extratos você derivatizan com anidrido benzóico e eu reativo 1,2,4-Hg (II) - triazol.
O tetraciclinas serão com uma mistura de metafosfórico / metanol azedo (8:2) para o um 0.5% em água, seguiu através de purificação com cartuchos C -18. A análise é levada a cabo por meio de HPLC com contrário e fase detectora UV, usando como fase móvel MeCN/NaH2PO4 0.05 m.
Serão confirmados os resultados obtidos nos procedimentos prévios analisando as amostras simultaneamente mediando o HPLC-MS / MS.
Serão o antiinflamatório e analgésico com uma metanol-água de mistura (1:1) e sonda de ultrasonidos. Os extratos aguados serão purificados por meio de cartuchos EXtrelut® NT. As análises serão levadas a cabo por meio de HPLC de fase inversa e elución com gradiente que usa as fases seguintes móveis: Para) 20 mm. de M de amónico-1 de acetato ácido acético; B) metanol; e C) dilui. A descoberta será levada a cabo por meio de espectrometría de massas.
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B. Avaliação global da presença de fármacos nos ecossistemas
As metodologias analíticas serão aplicadas desenvolvido previamente a amostras de lodos e bioindicadores que serão obtidos em uma campanha de amostragem.
O bioindicadores selecionaram em função da experiência adquirida no estuios prévio de CONTAMAR LÍQUIDO e PROTEOBIOMAR, é: Scrobicularia bivalve chamam e galinha de Chamelaea e o poliqueto diversicolor de Nereis.
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C. Estude de biomarcadores convencional
Serão avaliados os níveis de biomarcadores molecular baseado na caracterização de antioxidativas de enzimas, biotransformadoras de enzimas, danifica oxidativos em biomoléculas e metalotioneinas nivela e acetilcolinoesterasa no bioindicdores e selecionou áreas.
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E. Coordenação e integração de resultados
Os grupos do consórcio entrarão em contato permanente, graças aos recursos atuais telemáticos, para a coordenação dos trabalhos deles/delas. Eles também serão organizados lojas cada 6 meses de um modo alternativo em Huelva e Farol para troca de experiências e informação, harmonização de resultados e transferência de conhecimento metodológico.
Com a informação que é gerada ele/ela poderá se estabelecer recomendações em você trabalhe os revisores para evitar o efeito dos poluente emergentes considerado na área litoral do Sudoeste de Espanha-Portugal.
TIME PARTICIPANTES E REGISTRO DO GRUPO DE INVESTIGAÇÃO
Times participantes
- JOSE LUIS GÓMEZ ARIZA. Email:
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- MARIA JOAO BEBIANO. Email:
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- JULIAN BLASCO. Email:
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- TAMARA GARCÍA BARRERA. Email:
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- RUT FERNANDEZ TORRES. Email:
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- MACARENA GONZÁLEZ FERNÁNDEZ. Email:
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- FERNANDO MORENO ROLDÁN. Email: fernando.moreno@ dqcm.uhu.es
- JOSE MANUEL MANSO SAYAGO. Email: jose.manso@ dqcm.uhu.es
- ROCÍO JARA BIEDMA. Email:
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- MANUEL CONTRERAS ACUÑA. Email:
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- AMANDA GAGO TINOCO. Email:
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Registro do grupo de investigação
O grupo de investigação "Análise Ambiental e Bioanálisis" que pertencem para a Universidade de Huelva (FQM141) e os grupos de investigação do M de Professores. Bebiano (universidade de Algave - farol, Portugal) e J. Blasco (Instituto de Ciências Marinhas - Cádiz) que participam projetam agora, desenvolveu uma muito intensa e frutífera colaboração em projetos e estudos prévios e ele/ela tornou possível o presente pedido em casamento no que são chegadas metodologias realmente inovadoras no campo da Química Analítica e do ómicas, procurando uma integração que permite avaliar a resposta biológica aos efeitos dos poluente nos sistemas ambientais.
O grupo FQM141 do Plano andaluz de objetos pegados de Investigação (PAI) mais que 25 anos que desenvolvem procedimentos de análise novos, especialmente no campo do especiación metálico e metodologias relacionado com o ambiente e a contaminação. A experiência do grupo neste campo o/a levou participar de projetos diversos como 1FD97-0610, REN2002-04366 e CTM2006-08960, CONTAMAR LÍQUIDO e PROTEOBIOMAR que constituem justificações de antecedente do presente proposto.
O grupo FQM-141 é pioneiro na Espanha no campo do especiación químico, o metalómica e os estudos ambientais relacionaram com diferencial e poluente emergentes, depois de ter participado de 11 projetos nacionais e 6 europeus que geraram uns 180 publicações nos últimos 15 anos. O grupo também foi consultado como perito em tópicos ambientais para organismos diversos e entidades de público por meio de acordos ou contratos de investigação.
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